Uno de los problemas más comunes que nos podemos encontrar en nuestros análisis es una línea base ruidosa en nuestros cromatogramas. Para análisis en los que nuestros picos cromatográficos tienen una relación señal/ruido muy elevada es probable que ésta situación no represente mayor problema. Sin embargo, en situaciones donde los intérvalos de tolerancia son muy cerrados o manejamos concentraciones de analitos muy bajas (por no mencionar análisis de sustancias relacionadas) mantener el ruido de nuestros detectores al mínimo es crucial para el éxito de nuestros análisis.
A continuación me gustaría enlistar algunas de las causas y soluciones más comunes para mantener el ruido del detector al mínimo en análisis por HPLC con detectores UV-Vis.
Causas comunes de ruido en la línea base en HPLC
Calidad de nuestros solventes y aditivos.
Quizá no sea sopresa para muchos que la calidad de nuestros solventes y aditivos para fase móvil es determinante en el nivel de ruido en nuestros detectores. Especialmente en análisis cuyas longitudes de onda se encuentren en el rango del UV, solventes contaminados (con frecuencia el agua) elevarán con certeza el ruido del detector. Recomendamos siempre utilizar solventes grado cromatográfico para minimizar éste problema y, por supuesto, mantener limpios nuestros sistemas de filtración.
Burbujas o aire atrapado en la celda del detector.
Aunque es difícil saber con certeza si existen o no burbujas en el detector, si hemos cuidado la calidad de nuestros solventes y observamos ruido en el detector vale la pena considerar ésta alternativa. Si observamos una línea base ruidosa podemos pasar solvente orgánico a través del detector para disolver posibles burbujas atrapadas (Cuidando siempre la compatibilidad de fases móviles para evitar precipitaciones en caso de utilizar buffers).
Celda del detector sucia
Continuando con posibles causas de ruido, el siguiente paso sería verificar si la celda de nuestro detector pudiese estar sucia. Aunque para diferentes equipos puede ser más fácil (o difícil) verificar ésta situación, si sospechamos de contaminación en la celda podemos realizar un lavado utilizando una mezcla de Agua : Ácido Fosfórico en una proporción 90 : 10.
Lámpara del detector con baja energía
Usualmente ésta causa es en la primera en la que pensamos cuando tenemos problemas de ruido en nuestros cromatogramas. Sin embargo, creemos que normalmente vale la pena explorar otras opciones primero. Una lámpara con baja energía puede producir inconsistencias y ruido en la línea base.
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